SnapGene安装教程 SnapGene使用教程

SnapGene是世界知名的分子克隆工具，拥有多种克隆工具，包括限制型克隆、TA克隆、网关克隆、融合克隆、NEBuilder 高保真克隆等，内置了超过2700个经过仔细注释的质粒和序列文件，包括来自所有主要供应商的常用克隆载体，工程师可以直接拿来使用进行克隆，比如使用SnapGene模拟Clontech克隆，将一个或者多个NDA片段插入质粒，使用Gateway 克隆可以在没有限制性内切酶的情况下构建质粒，它通过重组插入DNA 片段。为了方便大家的使用，小编精心制作了SnapGene安装教程和使用教程供大家参考学习，具体如下文：

	SnapGene中文破解版 v5.2.0 附使用教程
	授权方式：免费软件 软件类型：国产软件 软件语言：简体中文 软件大小：50.35 MB 更新日期：2022-04-20 运行环境：WinXP, Win2003, Vista, Win7, Win8, Win10	下载地址

SnapGene安装教程

1、下载本站为您带来的SnapGene中文破解版软件压缩包，解压得到“setup.exe”安装程序和“fix”破解文件及

2、双击安装程序，弹出安装路径选择窗口，设置安装路径，然后点击Next

3、查阅SnapGene的安装许可证协议，点击I Agree进入下一步

4、根据您的需要勾选组件，点击Next

5、选择开始菜单文件夹，使用默认的即可，点击Install

6、等待安装进度完成

7、安装完成后，直接关闭安装向导，这里先不要启动软件，下面我们要执行软件的破解工作

SnapGene破解教程

1、打开fix文件夹，将“SnapGene.exe”破解补丁复制到安装根目录下替换源文件，默认根目录为【C:\Program Files\SnapGene】

2、这样我们就完成SnapGene中文破解版软件的安装，启动后就可以免费无限制使用了

SnapGene使用说明

限制性克隆使用说明

限制性克隆是一种常见的克隆技术，其中限制性内切酶用于制备插入片段和用于连接的载体。

SnapGene 为模拟限制性克隆提供了一个简单的界面。如果您已经有一个程序，那么模拟将只需要几秒钟。如果克隆程序存在设计缺陷，则可以发现并纠正错误。

限制性克隆技巧

对于许多应用，传统的限制性克隆仍然是最好的方法。一些简单的技巧将有助于确保您的克隆顺利进行。

一、一般技巧

首先，在程序的每一步都要小心。从长远来看，这种方法可以节省时间。

确保 DNA 非常干净。准备载体或切除要插入的片段时，从大约 2 μg DNA 开始。

每次酶促反应后，用离心柱纯化 DNA。在 40 – 45 μl 10 mM Tris (pH 8.5) 中洗脱 DNA，然后进行下一个反应。(在用凝胶纯化 DNA 片段之前，无需使用离心柱。)

为了最大限度地提高效率，请尽量减少程序中的步骤数。例如，将平末端片段克隆到平端载体位点(如 SmaI 位点)比克隆到用 Klenow 或 T4 DNA 聚合酶平端的位点效果更好。

如有疑问，请使用凝胶纯化 DNA 片段。更清洁的起始材料将产生更好的结果。

二、准备向量

限制性克隆最常见的问题是起始载体在操作后被回收。这个问题有两个原因：载体的不完全消化，以及切割载体与自身的重新连接。下面描述的技巧将最大限度地减少这些影响。

确保载体的消化完成。使用过量的限制性内切酶(2 μg DNA 约 20 U)，消化约 4 小时。如果需要用两种具有不同最佳反应缓冲液的酶切割载体，请依次进行消化，并在其间进行离心柱纯化。

消化载体(如果合适，还可以钝化)后，用磷酸酶处理：在 37°C 下 1 小时处理 5' 突出端，如果 DNA 有任何平端或 3' 突出端，则在 50°C 下处理 1 小时。

用离心柱去除磷酸酶。通常不需要对载体进行凝胶纯化，因为磷酸酶处理会使产生的任何额外 DNA 片段失活。

使用载体，确保消化和磷酸酶反应完成。彻底反复涡旋混合物，不要让任何液滴逃脱酶处理。涡旋后短暂旋转是个好主意，以确保没有液滴留在试管侧面。

三、准备插入的片段

对于插入片段的制备，不完全消化不是一个严重的问题，因为片段的部分恢复是可以接受的。您可以使用相对较短的消化时间，对于双重消化，您可以使用对一种或两种酶不理想的反应缓冲液。

用凝胶纯化插入的片段。除了去除不需要的或未完全消化的 DNA 外，该过程还去除了酶和小分子。 使用透照仪观察 DNA 条带时，请勿使用 312 nm 或以下的短波长紫外光，因为 DNA 会受到严重破坏。请改用 360-365 nm 紫外灯。

如果插入的片段是通过 PCR 生成的，请在进行任何限制性消化之前用凝胶或离心柱对其进行纯化。如果您计划将平末端 PCR 片段(由聚合酶如 Pfu 生成)克隆到经过磷酸酶处理的载体中，请确保您的 PCR 引物具有 5'-磷酸。

四、结扎和转化

使用磷酸酶处理的载体，进行控制连接，其中插入的片段被省略。这种对照连接应该产生非常少的转化子，因为只有环状 DNA 分子才能有效转化 大肠杆菌 ，并且如果不连接磷酸化片段，载体就不会发生再环化。

如果 DNA 只有粘性末端，则在室温下连接约 1 小时。如果 DNA 有任何平末端，在室温下连接约 4 小时并使用高浓度 T4 连接酶。

五、小量制备和诊断文摘

如果与对照连接相比，插入片段的连接获得的转化体多于对照连接，那么您的克隆几乎肯定有效，通常只需进行 3-4 次小量制备即可。

在对小量制备进行诊断限制性消化时，始终将起始载体作为参考标准。

模拟融合克隆使用说明

In-Fusion ®克隆

Clontech 的In-Fusion 克隆是一种用于创建无缝基因融合的非常通用的方法。SnapGene 是第一个模拟此过程的软件。

对于 In-Fusion 反应，线性化载体与一种或多种具有重叠末端的 PCR 产物混合。

SnapGene 通过自动化引物设计简化了 In-Fusion 克隆。 要计划 In-Fusion 反应，只需选择您希望融合的 DNA 片段，SnapGene 就会选择合适的引物。